纽约自然历史博物馆的夜班保安拉里(本·斯蒂勒饰)在赶跑了妄图监守自盗的三个疯狂老同事，拯救了一到晚上就撒欢吵闹的博物馆藏品之后，总算过上了两天不用操心的舒服日子，不光儿子把他视为英雄，爱情翩翩降临，工作也升级为光鲜很多的解说员。可是好景不长，博物馆关门整修，藏品给挪到了华盛顿的史密森博物馆继续展出。

    拉里知道，虽然有老成持重的西奥多·罗斯福总统(罗宾·威廉姆斯饰)压阵，但他的一干能量过剩的藏品老友，在新家里也不会改掉爱胡闹的本性，于是他也跟着来到了华盛顿，打算看着他们，不让他们胡作非为。但他没有想到的是，邪恶的法老王用咒语唤醒了史密森博物馆里的藏品，新来的和坐地户之间为地盘，为荣誉，也可能什么也不为，就想打人，爆发了一场大战。

    拉里虽然得到了第一个驾机飞越大西洋的女豪杰艾米莉娅·埃尔哈特(艾美·亚当斯饰)的帮助，甚至就连林肯雕像都放下身段，力促双方和解，可无奈史密森博物馆里都是狠角色，不光是巨大的恐龙化石，猛犸象，甚至上世纪二三十年代的黑帮大亨阿尔·卡邦，星球大战中的黑武士也来横插一脚。而拉里越帮越忙，陷入了自身难保的悲惨境地，这回当猴子猛打他耳光之时，他连正常的回击都做不到，因为是两只猴子左右开弓